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新型冠状病毒假病毒的构建及其在血清中和抗体测定中的应用
新型冠状病毒假病毒的构建及其在血清中和抗体测定中的应用
作者:
梁婉欣
刘淑燕
段炼
周雪峰
邬林枫
刘文齐
张更伟
朱华晨
张国良
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
新型冠状病毒
假病毒
刺突蛋白
中和抗体
疫苗接种
摘要:
目的 构建新型冠状病毒(SARS-CoV-2)假病毒,优化假病毒制备条件并应用于中和抗体活性检测.方法 优化合成SARS-CoV-2刺突蛋白(S)基因,进行假病毒包装;通过Western blot检测S基因的表达;应用定量ELI-SA检测接种新冠灭活疫苗后血清中新型冠状病毒IgG抗体的滴度,同时应用假病毒中和实验对接种新冠疫苗后血清中和抗体活性进行评价.结果 成功构建了整合SARS-CoV-2 S基因的表达载体pcDNA3.1-S,确定pNL4-3.Luc.R-E-:pcDNA3.1-S最佳转染比例为2:1,可成功包装出高滴度的假病毒粒子.Western blot结果表明S蛋白已成功地在假病毒中进行表达.SARS-CoV-2假病毒可感染Vero、Huh7.5、A549-hACE2和293T-hACE2等4种靶细胞,表明所构建的假病毒具有感染活力,且具有广泛的宿主范围,其中293T-hACE2细胞感染假病毒后相对其他细胞株可检测出更高的萤火虫荧光素酶活性.ELISA检测接种新冠疫苗后收集的血清,结果表明接种第二针灭活疫苗一周后可检测出较高血清IgG滴度(S/CO=10.27±3.33),半年后血清IgG滴度降低(S/CO=2.36±2.25);假病毒中和实验结果表明1例IgG阳性(S/CO=10.32)免疫后血清可有效抑制SARS-CoV-2假病毒的感染活力,中和效价达到1/1 066.结论 成功构建SARS-CoV-2假病毒,该假病毒可用于后续有关SARS-CoV-2中和抗体活性检测和疫苗接种后体液免疫效果的评价研究.
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基于慢病毒载体系统构建重组JSRV-NM假病毒
JSRV-NM病毒
假病毒
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病毒包装
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内容分析
关键词云
关键词热度
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文献信息
篇名
新型冠状病毒假病毒的构建及其在血清中和抗体测定中的应用
来源期刊
中国热带医学
学科
医学
关键词
新型冠状病毒
假病毒
刺突蛋白
中和抗体
疫苗接种
年,卷(期)
2022,(3)
所属期刊栏目
论著|Articles
研究方向
页码范围
240-245
页数
6页
分类号
R563.1
字数
语种
中文
DOI
10.13604/j.cnki.46-1064/r.2022.03.09
五维指标
传播情况
被引次数趋势
(/次)
(/年)
引文网络
引文网络
二级参考文献
(0)
共引文献
(0)
参考文献
(0)
节点文献
引证文献
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同被引文献
(0)
二级引证文献
(0)
2022(0)
参考文献(0)
二级参考文献(0)
引证文献(0)
二级引证文献(0)
研究主题发展历程
节点文献
新型冠状病毒
假病毒
刺突蛋白
中和抗体
疫苗接种
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国热带医学
主办单位:
中华预防医学会
海南疾病预防控制中心
出版周期:
月刊
ISSN:
1009-9727
CN:
46-1064/R
开本:
大16开
出版地:
中国海南省海口市海府路44号
邮发代号:
84-20
创刊时间:
2001
语种:
chi
出版文献量(篇)
13183
总下载数(次)
5
总被引数(次)
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