猪瘟病毒抗体胶体金免疫层析试纸条的研制及初步应用

• 作者: 万颖 罗俊聪 石正旺 麻园 王丽娟 杨波 宋锐 周改静 曹丽艳 田宏 郑海学
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪瘟病毒 胶体金试纸条 抗体检测方法
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1-10
• 页数: 10页
• 分类号: S852.659.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2021.0197

摘要

为建立一种简便、快捷、特异、敏感的猪瘟病毒(CSFV)E2抗体的胶体金检测方法,本研究将E2蛋白用胶体金颗粒标记,作为金标抗原,将E2蛋白及其单克隆抗体包被在硝酸纤维素膜(NC)上,分别作为检测线(T线)和质控线(C线),组装成检测猪瘟E2蛋白抗体的胶体金免疫层析试纸条.结果 显示,该试纸条可在5～10 min完成检测,检测健康猪血清、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、口蹄疫A型病毒(FMDV-A)、口蹄疫○型病毒(FMDV-O)、塞内卡病毒(SVA)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、非洲猪瘟病毒(ASFV)的阳性血清均无交叉反应;检测CSFV阳性血清的灵敏度可达1∶64(ELISA效价为1∶128);通过对田间101份猪血清样品进行检测,并与商品化猪瘟病毒抗体检测试剂盒的检测结果比较,两者的kappa值为0.92,为高度一致;试纸条在常温(18～25℃)和4℃条件下可分别稳定保存6个月和9个月.上述结果表明,本研究制备的试纸条具有较高的敏感性和特异性,且具有检测快速、操作简便、结果容易判断等特点,因此,对猪瘟现场检测有实际应用价值.