肝脏特异性表达人脂肪酸转运蛋白5小鼠作为非酒精性脂肪肝的模型构建

• 作者: 陈立新 林创珍 张照辉 聂飚
• 来源期刊: 暨南大学学报（自然科学与医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 转基因小鼠 人脂肪酸转运蛋白5 显微注射 非酒精性脂肪肝
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 113-121
• 页数: 9页
• 分类号: R575.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.11778/j.jdxb.2022.02.001

摘要

目的:为研究非酒精性脂肪肝(NAFLD)的发病机制以及潜在候选药物疗效,构建人脂肪酸转运蛋白5(hFATP5)在肝脏过表达的转基因小鼠模型.方法:将hFATP5表达序列插入白蛋白启动子的下游,构建基因表达载体,C57BL/6小鼠的受精卵通过显微注射、胚胎移植,繁殖过表达hFATP5(hFATP5+)小鼠.通过实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法确认hFATP5的过表达.稳定传代和扩繁后,对hFATP5+小鼠与野生型小鼠进行4周的高脂饲料喂养,检测血清甘油三酯、总胆固醇,肝脏甘油三酯,行腹腔注射糖耐量实验.结果:hFATP5+小鼠的F1、F2代和C57BL/6野生型小鼠比较,hFATP5+小鼠hFATP5蛋白质和信使核糖核酸水平在心、肝、脾、肾、肺、肠、胃组织显著过表达.4周高脂喂养后,hFATP5+雄性小鼠的体质量、血总胆固醇、肝内甘油三酯含量均显著高于野生型雄性小鼠,且糖耐量显著较差,而雌性小鼠之间的相关指标未出现显著差异.结论:hFATP5+雄性小鼠在肝脏过表达hFATP5,获得FATP5半人源化小鼠模型,4周高脂饲养形成更显著的代谢综合征和NAFLD.FATP5转运过多长链脂肪酸入肝是NAFLD发生的关键因素之一.