应用ELISPOT方法筛选确定尼帕病毒融合糖蛋白和附着糖蛋白的H-2 d限制性T细胞表位

• 作者: 黄梦婧 邓瑶 赵志敏 陈晋妮 任皎 王文 沈晓玲 谭文杰
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 尼帕病毒 H-2 d限制 T细胞表位 IFN-γ ELISPOT
• 年，卷（期）: 2022,（4）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 287-292
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn112309-20220124-00026

摘要

目的:在小鼠中筛选和确定尼帕病毒(Nipah virus，NiV)融合糖蛋白(fusion glycoprotein，F)和附着糖蛋白(attachment glycoprotein，G)特异性的H-2 d限制性T细胞表位。 方法:本研究基于NiV F和G蛋白全序列设计合成多肽库(单肽长为15个氨基酸，前后肽重复10个氨基酸)，使用表达NiV F和G蛋白的DNA疫苗肌肉注射免疫BALB/c小鼠，通过矩阵设计将F和G抗原全序列肽库分别混合成肽池，取免疫后小鼠脾细胞进行IFN-γ ELISPOT检测，确定肽库中特异反应的优势表位肽。结果:F肽库筛选到12条特异性优势肽，第56条多肽产生的反应最强；G肽库筛选到4条特异性优势肽，第72条多肽产生的反应最强。结论:本研究使用IFN-γ ELISPOT方法筛选和确定了12条NiV F抗原特异性和4条NiV G抗原特异性H-2 d限制性优势T细胞表位，为NiV免疫学与疫苗研究提供了参考。