低强度脉冲超声联合脂肪间充质干细胞源性外泌体促进内皮细胞血管生成的实验研究

• 作者: 刘珺碧 蒋日月 王浩 邓倾 周青
• 来源期刊: 临床超声医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 低强度脉冲超声 脂肪间充质干细胞 外泌体 血管生成
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: R445.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-6978.2022.01.001

摘要

目的 探讨低强度脉冲超声(LIPUS)联合脂肪间充质干细胞(ADSCs)源性外泌体(ADSCs-Exos)对内皮细胞血管生成能力的影响.方法 取SD大鼠腹股沟处脂肪,采用酶消化法分离培养得到ADSCs,并对其表面分子进行鉴定.收集第3代ADSCs上清液提取ADSCs-Exos,应用透射电子显微镜、纳米颗粒跟踪分析仪、蛋白免疫印迹法观察其特征.将人脐静脉内皮细胞(HUVECs)按照不同处理方式分为对照组、外泌体组、LIPUS组及LIPUS+外泌体组,采用CCK-8实验、细胞划痕实验及小管形成实验检测不同处理方式对HUVECs增殖、迁移及成管能力的影响.结果 ADSCs形态呈梭形,表面蛋白CD34、CD45为阴性,CD29、CD90为阳性.ADSCs-Exos为形态一致的茶托样囊泡,表达标志性蛋白CD9和Tsg101,其粒径97.8％集中在(118.8±80.8)nm.CCK-8实验显示LIPUS+外泌体组吸光度值为1.882±0.138,明显高于外泌体组、LIPUS组及对照组(0.646±0.034、0.631±0.027、0.462±0.036),差异均有统计学意义(均P<0.05).细胞划痕实验显示LIPUS+外泌体组细胞迁移率为(87.7±4.5)％,均明显高于外泌体组、LIPUS组及对照组[(43.0±5.1)％、(34.7±2.3)％、(25.1±2.0)％],差异均有统计学意义(均P<0.05).小管形成实验显示LIPUS+外泌体组HUVECs形成管腔数量及周长均大于外泌体组、LIPUS组及对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 LIPUS联合ADSCs-Exos可有效促进血管内皮细胞的增殖、迁移及成管,具有促进血管生成能力的作用.