獐牙菜苦苷对PC12细胞氧糖剥夺再灌注损伤的保护作用及机制

• 作者: 王慧 兰小兵 郑萍 王晴 马琳 杨佳美 刘宁 余建强
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 獐牙菜苦苷 PC12细胞 氧糖剥夺再灌注 神经保护 氧化应激
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 论著|ORIGINAL ARTICLES
• 页码范围: 90-97
• 页数: 8页
• 分类号: R285|R743
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2022.02.002

摘要

目的 探讨獐牙菜苦苷(Swe)对PC12细胞氧糖剥夺再灌注(OGD/R)损伤的保护作用及其机制.方法 ① 将PC12细胞放入恒温缺氧箱内(缺氧缺糖)4 h,再置CO2培养箱正常培养(再灌注)24 h构建PC12细胞OGD/R模型.再灌注同时分别给予溶剂(OGD/R模型组)、Swe 0.1,1.0和10.0μmol·L-1(Swe组)或阳性对照药尼莫地平12μmol·L-1(尼莫地平组).MTT法检测细胞存活率;试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率;DCFH-DA荧光探针检测PC12细胞内活性氧(ROS)含量;比色法测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量;Fluo-3 AM荧光探针测定PC12细胞内Ca2+浓度,JC-1探针检测线粒体膜电位(MMP)水平.②构建PC12细胞OGD/R模型,再灌注同时分别给予溶剂(OGD/R模型组)、Swe 10μmol·L-1(Swe组)或尼莫地平12μmol·L-1(尼莫地平组),流式细胞术检测细胞凋亡;Western印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax蛋白表达及胱天蛋白酶3活化水平.结果 ①与细胞对照组相比,OGD/R模型组细胞存活率显著降低,LDH漏出率显著增加,Ca2+浓度显著升高,MMP水平显著降低,ROS和MDA含量显著增加,SOD,CAT和GSH-Px活性显著降低,细胞凋亡率显著升高,Bcl-2/Bax比值显著降低,胱天蛋白酶3活化水平显著增加(均P<0.01).与OGD/R模型组相比,Swe 0.1μmol·L-1组细胞SOD和CAT活性显著增强,胞内Ca2+浓度及ROS和MDA含量显著降低(P<0.05);Swe 1和10μmol·L-1组及尼莫地平组细胞存活率显著增加,LDH漏出率显著降低,Ca2+浓度显著降低,MMP水平显著升高,ROS和MDA含量显著降低,SOD,CAT和GSH-Px活性显著增强(P<0.05,P<0.01).② 与OGD/R模型组相比,Swe 10μmol·L-1组和尼莫地平组细胞凋亡率显著降低(P<0.01);Swe 10μmol·L-1组Bcl-2/Bax比值显著增加,胱天蛋白酶3活化水平显著降低(P<0.01).结论 Swe对PC12细胞OGD/R损伤具有保护作用,其作用机制与抗氧化应激损伤和细胞凋亡有关.