慢病毒介导SHCBP1低表达对黑色素瘤B16细胞增殖的影响

• 作者: 孙志阳 冯光 雷静静 唐铖铖 孙晨皓 王令 路宏朝
• 来源期刊: 生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: SHCBP1 细胞增殖 B16细胞 慢病毒干扰
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告|STUDY REPORTS
• 页码范围: 11-16
• 页数: 6页
• 分类号: Q813|R739.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2022.01.011

摘要

构建Shcbp1慢病毒干扰载体,探究SHCBP1在黑色素瘤B16细胞中的生物学功能.通过设计靶向干扰小鼠Shcbp1基因的shRNA-1和shRNA-2以及对照序列shRNA-NC,连接至慢病毒骨架载体,利用HEK293T细胞包装慢病毒颗粒,侵染B16细胞,检测干扰效率,并通过CCK-8和流式细胞术检测细胞活力和细胞周期.利用Western Blot检测增殖相关基因的表达.结果显示:敲低Shcbp1显著抑制B16细胞增殖;流式细胞术检测结果发现,敲低Shcbp1将B16细胞阻滞在G1期;ERK1/2的磷酸化水平降低,P21的表达水平升高.结果表明SHCBP1可能通过ERK1/2信号通路抑制P21的转录,加速B16细胞从G1到S期进程.