沙蟾毒精激活Rho A/ROCK1信号通路诱导急性白血病细胞凋亡的分子机制研究

• 作者: 李志强 姜秀星 胡金娇 丁鑫 雷令 高宁
• 来源期刊: 陆军军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 沙蟾毒精 急性白血病 Rho因子相关激酶1 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2022,（7）
• 所属期刊栏目: 药学|Pharmacy
• 页码范围: 700-710
• 页数: 11页
• 分类号: R733.7|R966|R996.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.16016/j.2097-0927.202109162

摘要

目的 研究沙蟾毒精(arenobufagin,ARE)对急性白血病细胞的凋亡诱导作用及可能的分子机制.方法 急性白血病细胞Jurkat和MV-4-11经不同浓度(0、10、20、40、80 nmol/L)ARE作用24 h,80 nmol/L ARE 作用不同时间(0、6、12、18、24 h)或 ROCK1 抑制剂 Y-27632(20 μmon/L)预处理 1 h后80 nmol/L ARE作用24 h,采用MTT检测ARE抑制急性白血病细胞增殖的能力;采用流式细胞术检测ARE诱导急性白血病细胞凋亡的能力;采用Western blot和CoIP实验检测急性白血病细胞经ARE作用后细胞中凋亡相关蛋白和Rho A/ROCK1信号通路相关蛋白的变化情况.结果 ARE对Jurkat和MV-4-11细胞的抑制增殖作用呈剂量依赖性和时间依赖性(P＜0.01),对Jurkat和MV-4-11细胞凋亡诱导作用亦呈剂量和时间依赖性(P＜0.01);Western blot检测结果显示:ARE可激活ROCK1信号通路,促进BAX移位至线粒体,Cytochrome c(Cyto c)和AIF由线粒体释放入细胞质,增加Caspase 3和Caspase 7剪切激活,增加PARP1剪切,并减少XIAP表达,其上述作用具有剂量依赖性和时间依赖性(P＜0.01);使用Y-27632抑制ROCK1信号通路可明显阻断ARE诱导的BAX移位至线粒体、Cyto c和AIF向细胞质的释放、Caspase 3和Caspase 7的剪切激活、PARP1的剪切、XIAP表达的下调以及细胞凋亡(P＜0.01).结论 ARE通过激活Rho A/ROCK1信号通路有效诱导急性白血病细胞(Jurkat、MV-4-11)发生凋亡.