不同核酸提取试剂盒对血浆游离DNA提取效果的比较

• 作者: 方仲表 沈伟锋 饶焕新 章余旋 潘志文 吴欧
• 来源期刊: 国际检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 天根 Qiagen 核酸提取 游离DNA EGFR突变基因
• 年，卷（期）: 2022,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 979-983,989
• 页数: 6页
• 分类号: R446.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4130.2022.08.017

摘要

目的 比较北京天根生化科技有限公司生产的大体积游离核酸提取试剂盒(磁珠法,货号:DP-710,以下简称天根)与德国Qiagen公司生产的Circulating Nucleic Acid kit(硅胶膜吸附柱法,货号:55114,以下简称Qiagen)对血浆当中游离DNA(cfDNA)的提取效果.方法 收集Qiagen和天根试剂盒的基本情况,采用浙江省肿瘤医院提供的临床血浆样本,用Qiagen和天根分别提取血浆样本中的cfDNA.用超微紫外分光光度仪分析两种试剂盒提取得到cfDNA的浓度和纯度.采用人表皮生长因子受体(EGFR)突变基因检测试剂盒(多重荧光PCR法)评价两种试剂盒提取血浆中cfDNA的提取效果,通过扩增结果的Ct值分析两种不同试剂盒对人EGFR基因突变的检出率和重复性的影响.结果 在cfDNA提取浓度、纯度方面,Qiagen的cfDNA提取浓度明显高于天根,且Qiagen提取得到的cfDNA纯度更优;在人EGFR突变基因阳性检出率方面,Qiagen阳性检出率为100％,天根阳性检出率为85％;在重复性方面,Qiagen试剂盒提取的cfDNA的检出结果Ct值的变异系数(CV)均小于5％,而天根试剂盒有分部分CV超过5％.结论 Qiagen试剂盒在cfDNA提取浓度、纯度,人EGFR突变基因的阳性检出率、重复性方面的表现均要优于天根试剂盒.