靶向cofilin2基因RNAi对鸭病毒性肠炎病毒增殖的影响

• 作者: 王微 华敏 张芸 李涛 张黔东 袁阳 程振涛 文明
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭病毒性肠炎病毒 DEV RNA干扰 cofilin2
• 年，卷（期）: 2022,（3）
• 所属期刊栏目: 研究简报|RESEARCH NOTES
• 页码范围: 983-989
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2022.03.032

摘要

旨在探讨cofilin2基因的表达在鸭病毒性肠炎病毒(DEV)增殖过程中的影响.本研究通过已获得的鸭源cofilin2全基因序列(GenBank登录号:MF434775),设计出4对shRNA序列,插入载体中,并转染到鸭胚成纤维细胞中,经FQ-PCR方法和荧光显微镜观察筛选出具有较高干扰效率的shRNA序列,用干扰效率较高的shRNA序列转染到鸭胚成纤维细胞中抑制cofilin2基因的表达,再检测cofilin2在DEV复制过程中表达情况.结果显示:4对shRNA干扰质粒经转染至鸭胚成纤维细胞后,经荧光显微镜观察,构建的4对shRNA干扰质粒均成功转染并得到表达;4对干扰质粒沉默率分别为4.96％±0.78％、41.12％±2.94％、17.55％±2.07％、54.02％±1.73％,以cofilin2-86的沉默效率最高;cofilin2-86转染到鸭胚成纤维细胞,经DEV感染不同时间,其DEV核酸表达量明显下降.综上所述,靶向cofilin2基因RNA干扰在DEV复制和增殖过程发挥重要作用.