紫草素与依布硒啉对金黄色葡萄球菌的协同作用

• 作者: 谭超 周靖轩 卢倩倩 刘彬彬 蔡轶 王君 邹黎黎
• 来源期刊: 微生物学报
• 关键词: 金黄色葡萄球菌 依布硒啉 紫草素 硫氧还蛋白还原酶 活性氧
• 年，卷（期）: 2022,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告|RESEARCH ARTICLES
• 页码范围: 1049-1060
• 页数: 12页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20210396

摘要

[目的]探讨紫草素(shikonin,SKN)协同依布硒啉(ebselen,EbSe)抗金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)的作用及机制.[方法]分光光度法测定紫草素-依布硒啉抗金黄色葡萄球菌活性;碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色检测紫草素-依布硒啉杀菌效果;透射电子显微镜观察紫草素-依布硒啉对金黄色葡萄球菌细胞形态的影响.通过荧光探针二氯荧光素二乙酸酯(2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate,H2DCFDA)检测紫草素-依布硒啉上调细菌胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)产量的能力;利用5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)[5,5'-dithiobis-(2-nitrobenzoic acid),DTNB]实验检测紫草素-依布硒啉对硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase,TrxR)活性的影响.通过加入还原剂二硫苏糖醇(DL-dithiothreitol,DTT)清除ROS进行挽救实验,复测相关指标,对上述结果进行验证.收集临床多重耐药金黄色葡萄球菌(multidrug-resistant Staphylococcus aureus,MDRS),通过分光光度法测定紫草素-依布硒啉对MDRS的抑菌活性.[结果]依布硒啉与紫草素均对金黄色葡萄球菌有抗菌活性,且10μmol/L依布硒啉与5μmol/L紫草素可发挥显著的协同抑菌活性(P＜0.000 1).紫草素-依布硒啉可协同抑制TrxR活性(P＜0.01),同时显著上调金黄色葡萄球菌胞内ROS产量(P＜0.001).通过回补实验发现,DTT可挽救紫草素-依布硒啉对金黄色葡萄球菌的损伤.紫草素-依布硒啉对MDRS有明显的抑菌活性(P＜0.000 1).[结论]紫草素-依布硒啉可通过协同靶向TrxR,诱导细菌胞内产生大量ROS,介导金黄色葡萄球菌死亡.