STAT6介导的巨噬细胞极化对布鲁氏菌胞内存活的影响

• 作者: 席静 王月丽 邓肖玉 杨琴 李培东 张江伟 孙天浩 朱良全 易继海 陈创夫
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 布鲁氏菌 巨噬细胞极化 STAT6信号通路 胞内存活
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 基础兽医|BASIC VETERINARY MEDICINE
• 页码范围: 263-271
• 页数: 9页
• 分类号: S852.614
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2022.01.026

摘要

旨在探讨STAT6介导的巨噬细胞极化对布鲁氏菌胞内生存的影响.本研究采用布鲁氏菌光滑株S2308(S2308)和粗糙型疫苗株RB51(RB51)侵染巨噬细胞.利用qRT-PCR检测M1型巨噬细胞标志因子p65、NOS2和IL-1β,M2型巨噬细胞标志因子STAT6、ARG1、IL-10的mRNA表达水平;流式细胞术检测M1型标记分子CD86和M2型标记分子CD206的表达;Western blot检测p-STAT6蛋白及抑制剂AS对蛋白的抑制作用;ELISA检测M1型细胞因子TNF-α、IL-12和M2型细胞因子IL-4、IL-10的表达量;最后对胞内菌落进行CFU计数.qRT-PCR结果显示,在感染8、12 h时可显著诱导M1型因子mRNA转录表达,72 h时低表达,而M2型因子在72 h时高表达;流式细胞术结果显示,S2308感染12 h可显著诱导CD86的表达,感染72 h可显著诱导CD206的表达,但RB51对二者无影响;Western blot结果显示,S2308菌株在感染72 h时激活STAT6信号通路,而RB51几乎不激活该通路,抑制剂AS在2 μmol·L-1浓度时抑制效果最佳;ELISA结果显示,AS抑制剂可显著抑制IL-4、IL-10的释放,并促进TNF-α、IL-12的释放;CFU计数结果显示,S2308组的胞内菌呈先降低后显著上升趋势,加入AS抑制剂后可显著抑制布鲁氏菌胞内复制.布鲁氏菌S2308在感染后期能够通过STAT6诱导M1型巨噬细胞向M2型转化,并促进Th2型细胞因子的释放,从而有利于布鲁氏菌的胞内生存.而RB51几乎不激活该通路,不影响胞内生存.