甘草素对非小细胞肺癌细胞放疗敏感性的影响

• 作者: 代军强 刘鑫 李甸源
• 来源期刊: 广州中医药大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 甘草素 非小细胞肺癌 miR-21/MEG2轴 放疗敏感性 A549细胞
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 中药药理与质量
• 页码范围: 402-409
• 页数: 8页
• 分类号: R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13359/j.cnki.gzxbtcm.2022.02.030

摘要

[目的]探讨甘草素对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞放疗敏感性的作用及机制.[方法]体外培养NSCLC细胞株A549.使用不同浓度甘草素处理,筛选20％抑制浓度(IC20)的甘草素浓度.经甘草素处理后,克隆形成实验观察细胞放疗敏感性,选择半数细胞存活分数(SF)对应的放射线剂量进行后续实验.A549细胞随机分为对照组、甘草素组、miR-21 mimics-NC组、miR-21 mimics组、甘草素+miR-21 mimics组.miR-21 mimics-NC组转染miR-21模拟物阴性对照,miR-21 mimics组、甘草素+miR-21 mimics组转染miR-21模拟物,24 h后观察转染效果,甘草素组、甘草素+miR-21 mimics组加入0.2 mmol/L甘草素作用24 h、4 Gy 6 MV-X射线照射3 h进行后续实验.细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;定量聚合酶链反应(qPCR)检测miR-21、蛋白络氨酸磷酸酶MEG2 mRNA相对表达量;双荧光素酶报告基因实验验证miR-21与MEG2的靶向关系;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测MEG2蛋白相对表达量.[结果]选取甘草素浓度为0.2 mmol/L,甘草素处理后,A549细胞SF降低(P<0.05),放射增敏比>1.与对照组比较,甘草素组细胞相对活力、miR-21相对表达量降低,细胞凋亡率、MEG2 mRNA和蛋白相对表达量升高(P<0.05),miR-21 mimics组细胞相对活力、miR-21相对表达量升高,细胞凋亡率、MEG2 mRNA和蛋白相对表达量降低(P<0.05);与甘草素组比较,miR-21 mimics组、甘草素+miR-21 mimics组细胞相对活力、miR-21相对表达量升高,细胞凋亡率、MEG2 mRNA和蛋白相对表达量降低(P<0.05);与miR-21 mimics-NC组比较,miR-21 mimics组细胞相对活力、miR-21相对表达量升高,细胞凋亡率、MEG2 mRNA和蛋白相对表达量降低(P<0.05);与miR-21 mimics组比较,甘草素+miR-21 mimics组细胞相对活力、miR-21相对表达量降低,细胞凋亡率、MEG2 mRNA和蛋白相对表达量升高(P<0.05).双荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-21直接靶向MEG2.[结论]甘草素可以抑制NSCLC细胞增殖,促进细胞凋亡及增强放疗敏感性,其机制可能与调控miR-21对MEG2转录和翻译的抑制有关.