外泌体介导miR-199a-3p靶向ARPC2基因对肾癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

• 作者: 樊松强 张红森 汤尧
• 来源期刊: 中国老年学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 外泌体 miR-199a-3p ARPC2 肾癌 增殖 迁移 侵袭
• 年，卷（期）: 2022,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 934-939
• 页数: 6页
• 分类号: R737.11
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9202.2022.04.048

摘要

目的 探讨外泌体介导miR-199a-3p对肾癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制.方法 提取HK-2、786-O细胞培养液中的外泌体,电镜下观察外泌体形态;将miR-NC、miR-199a-3p转染至786-O细胞后用去除外泌体的DMEM培养液培养48 h,实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测外泌体中miR-199a-3p表达水平,Western印迹检测外泌体表面标志物CD63、CD81.将miR-NC、miR-199a-3p转染至786-O细胞中后加入外泌体进行培养,记为EXO-miR-NC组、EXO-miR-199a-3p组;将miR-199a-3p分别与pcDNA-NC、pcDNA-ARPC2共转染至786-O细胞中后加入外泌体进行培养,记为EXO-miR-199a-3p+pcDNA-NC组、EXO-miR-199a-3p+pcDNA-ARPC2组;将miR-NC、anti-miR-NC、miR-199a-3p、anti-miR-199a-3p、si-ARPC2、si-NC、分别转染至786-O细胞中,分别记为miR-NC组、anti-miR-NC组、miR-199a-3p组、anti-miR-199a-3p组、si-ARPC2组、si-NC组.qRT-PCR检测786-O细胞中miR-199a-3p表达水平;Western印迹检测786-O细胞中肌动蛋白相关蛋白2/3复合亚基(ARPC)2蛋白表达水平;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率;Transwell检测细胞迁移和侵袭;荧光素酶报告实验检测miR-199a-3p和ARPC2的靶向关系.结果 HK-2和786-O细胞均有外泌体,miR-199a-3p在786-O细胞外泌体中低表达;过表达miR-199a-3p后786-O细胞外泌体中miR-199a-3p表达水平显著升高(P<0.05).外泌体介导miR-199a-3p的肾癌细胞786-O细胞迁移数、存活率、侵袭数显著降低(P<0.05);敲减ARPC2肾癌细胞786-O细胞迁移数、存活率、侵袭数显著降低(P<0.05).miR-199a-3p靶向调控ARPC2,高表达ARPC2部分逆转了外泌体介导的miR-199a-3p对786-O增殖、迁移和侵袭的抑制作用.结论 外泌体介导的miR-199a-3p可抑制肾癌细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与ARPC2有关.