CARD6通过调控ASK1表达抑制炎症反应和细胞凋亡保护心肌缺血再灌注损伤

• 作者: 赵海燕 严金龙 班努·库肯 新疆医科大学第七附属医院
• 来源期刊: 中西医结合心脑血管病杂志
• 关键词: 心肌缺血再灌注损伤 胱天蛋白酶募集域蛋白6 细胞凋亡信号调节激酶1 炎症反应 细胞凋亡 实验研究
• 年，卷（期）: 2024,（14）
• 所属期刊栏目: 基础医学论著/研究
• 页码范围: 75-81
• 页数: 7页
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨胱天蛋白酶募集域蛋白6(CARD6)对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)中炎症反应和细胞凋亡的影响，并分析其相关分子机制。方法:将60只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(MIRI组)、MIRI+空载慢病毒(LV-NC)组、MIRI+CARD6过表达慢病毒组(MIRI+LV-CARD6组),每组15只。除Sham组外，其他各组大鼠采用手术结扎冠状动脉左前降支的方法构建MIRI模型。采用全自动生化分析仪检测心肌损伤指标含量，酶联免疫吸附法(ELISA)检测炎性细胞因子水平，苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠心肌组织形态学变化，原位末端标记测定(TUNEL)染色法检测大鼠心肌细胞凋亡情况，蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠心肌组织中凋亡相关蛋白表达，实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法和Western Blot法检测大鼠心肌组织中CARD6、细胞凋亡信号调节激酶1(ASK1)mRNA和蛋白表达。结果:与Sham组比较，MIRI组大鼠心肌细胞水肿变性，大量间质炎性细胞浸润，存在明显心肌组织病理损伤；大鼠血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)水平及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平均升高；心肌细胞凋亡率升高，B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白表达量降低，Bcl-2相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达量均升高；心肌组织中CARD6蛋白和mRNA表达水平均降低，ASK1蛋白和mRNA表达水平均升高，差异均有统计学意义(P<0.05)。与MIRI组比较，MIRI+LV-CARD6组大鼠心肌细胞水肿减轻，间质炎性渗出减少，心肌组织病理损伤明显减轻；大鼠血清LDH、CK、CK-MB、cTnT、TNF-α、IL-6、IL-1β、MCP-1水平均降低；心肌细胞凋亡率降低，Bcl-2蛋白表达量升高，Bax和Caspase-3蛋白表达量均降低；心肌组织中CARD6蛋白和mRNA表达水平均升高，ASK1蛋白和mRNA表达水平均降低，差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CARD6通过抑制炎症反应和细胞凋亡保护MIRI,其作用机制与调控ASK1表达有关。