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将两个或两个以上外源基因表达单元整合到枯草芽孢杆菌染色体同一个整合位点的方法

摘要:
本发明公开了将两个或两个以上外源基因表达单元整合到枯草芽孢杆菌染色体同一整合位点的方法。首先将外源基因表达单元克隆到含抗性基因筛选标记A的整合质粒,利用整合质粒将外源基因表达单元整合到枯草芽孢杆菌染色体获得重组菌1,然后利用替换抗性基因筛选标记的质粒将重组菌1中的抗性基因筛选标记A替换为另一抗性基因筛选标记B,得到重组菌2。整合质粒再转化重组菌2,通过抗性基因筛选标记A和B进行筛选得到包含两个外源基因表达单元的重组菌。重复替换抗性基因和整合,可以获得两个以上相同或不同的外源基因表达单元整合到枯草芽孢杆菌染色体的重组菌。这种方法对构建整合型枯草芽孢杆菌表达菌株具有重要的应用前景。
基本信息
专利类型 发明
申请(专利)号 CN201010563647.7 申请日 2010-11-29
授权公布号 CN102127530B 授权公告日 2012-07-25
申请人 南宁邦尔克生物技术有限责任公司 
地址 广西壮族自治区南宁市高新区科园大道60号
发明人 廖东庆 李晓明 黄日波 张云光 韦玉琴 梁莲华 李丛 
分类号 C12N15/09(2006.01) C12N1/21(2006.01) C12R1/125(2006.01)N  主分类号 C12N15/09(2006.01)
国省代码 广西 页数 21
代理机构 广西南宁公平专利事务所有限责任公司
代理人 南宁邦尔克生物技术有限责任公司 
法律状态
法律状态公告日 法律状态 法律状态信息
2012.07.25 授权 授权
2011.08.31 实质审查的生效 实质审查的生效IPC(主分类):C12N 15/09申请日:20101129
2011.07.20 公开 公开
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