猪流行性腹泻病毒的分离培养与鉴定

• 来源期刊: 上海农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪流行性腹泻病毒 分离培养 鉴定 盲传
• 年，卷（期）: 1999,（2）
• 页码范围: 41-44
• 页数: 4页
• 分类号: S858.28
• 语种: 中文

摘要

上海市农业科学院畜牧兽医研究所在上海郊区分离到一株猪流行性腹泻病毒(PEDV).以人工攻毒发病猪的小肠粘膜无菌处理后接种已长成单层的VERO(非洲绿猴肾)传代细胞,并在维持液中加入胰酶50μg/mL和2％的小牛血清.盲传第4代时,于接种后的第3天出现致细胞病变作用(CPE).自第8代开始,CPE于接种后16h开始出现,以后就一直有规律地稳定出现.CPE的主要表现为细胞的折光度降低、细胞圆缩、颗粒变性、细胞融合而形成多核巨细胞.至40~48h,CPE明显,细胞部分脱落,收获.同时,将人工攻毒发病猪的小肠粘膜无菌处理后的病毒与经胰酶消化分散的VERO一起培养.并在生长液中加入胰酶50μg/mL,3~4d长成单层.如此经盲传若干代,可用荧光抗体检测到在细胞浆内有特异性的荧光颗粒出现.目前,该带毒的VERO细胞已传至102代.