分泌人源性单克隆抗体永生化淋巴细胞系的构建

• 作者: 余鹰 刘丝荪 刘秋如 妇产科 徐方云 易为民 温淦升 邬淑云 龚文华
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 淋巴细胞 抗体,单克隆 转染 免疫法 卵巢肿瘤
• 年，卷（期）: 1999,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 707-710
• 分类号: R3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.1999.08.010

摘要

目的:构建分泌人源性单克隆抗体(McAb)的永生化B淋巴细胞系.方法:用正丁醇法提取的人卵巢癌细胞系ao10/17抗原在含免疫活化剂的无血清培基中免疫人淋巴细胞;将制备ao 10/17细胞DNA转染经体外免疫的淋巴细胞.采用ELISA筛选和有限稀释法克隆化.结果:建成4株分泌抗卵巢癌McAb的转染体细胞AT1、AT2、AT3和AT4;McAb相加试验表明,它们识别卵巢癌抗原分子的同一表位.AT4已在体外培养460多天,冻存复苏后仍保持抗体产生能力.夹心ELISA发现,人源性McAb AT4能与卵巢癌细胞表面可溶性抗原发生免疫反应.结论:体外免疫和DNA转染的结合,可建成分泌人源性McAb的永生化B淋巴细胞系,为人源性McAb的产生提供了一条技术途径.