16S~23S RDNA间隔区序列RFLP分析在分枝杆菌分类鉴定中的应用

• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 关键词: 间隔区序列 限制性片段长度多态性 分类鉴定
• 年，卷（期）: 1999,（12）
• 页码范围: 35-37
• 页数: 3页
• 语种: 中文

摘要

目的:通过对分枝杆菌16S~23SRDNA间隔区序列DNAPCR扩增和限制性酶切分析,评价其在分枝杆菌分类鉴定中的价值.方法:对21种分枝杆菌和9种亲缘关系较远的非分枝杆菌和4种亲缘关系较近的非分枝杆菌的16S－23SRDNA间隔区序列DNA进行PCR扩增并对扩增产物进行限制性内切酶HAEⅢ.MSPI消化反应,分析不同菌种扩增片段及其限制性片段长度多态性的差异.结果:PCR扩增结果显示:分枝杆菌一般扩增出1~2带,非分支杆菌一般有1~3条带.80％的缓慢生长分枝杆菌扩增片段集中在340~400BP,快速生长分枝杆菌扩增片段集中在470~575BP.单从扩增产物的琼脂糖凝胶电泳只能鉴定42％的受试菌种.酶切结果显示:3种分枝杆菌酶切图谱没有区别,大部分分枝杆菌的酶切图谱彼此不同,而大部分非分枝杆菌不能被HAEⅢ.MSPⅠ消化.结论:说明16S~23SRDNA间隔区序列DNAPCR扩增和限制性片段长度多态性分析是分枝杆菌菌种分类鉴定的一种快速、有效的方法.