葡萄糖转运蛋白1基因转染对系膜细胞功能的影响

• 作者: 刘志红 刘栋 朱加明 李颖健 郭啸华 黎磊石
• 来源期刊: 中华肾脏病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 单糖转运蛋白质类 细胞外基质 系膜细胞
• 年，卷（期）: 2000,（6）
• 所属期刊栏目: 肾脏细胞分子生物学专题论著
• 页码范围: 357-362
• 页数: 6页
• 分类号: R6
• 字数: 5631字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1001-7097.2000.06.004

摘要

目的通过建立葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)的基因转染系统,观察GLUT1的过度表达对系膜细胞功能的影响.方法利用逆转录病毒载体建立CLUT1基因转染的大鼠系膜细胞(MCGT1),以β-半乳糖苷酶转染细胞(MCLacZ)为对照.用2-脱氧-3H-萄萄糖(2-DG)测定细胞葡萄糖摄入,流式细胞仪分析细胞表型,3H-脯氨酸掺入和流式细胞仪分别检测细胞胶原和纤维连接蛋白(FN)的合成,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞胶原Ⅳ、FN的表达.结果MCGT1的2-DG摄入率明显高于MCLacZ[(741.0±60.5)dpm·μgprot-1比(92.2±9.0)dpm·μgprot-1,P<0.01].动力学分析发现MCGT1的Vmax是MCLacZ的3.7倍,而两者Km值无明显差别.在相同的葡萄糖浓度下,MCGT1的乳酸生成增多,表现出细胞体积增大、RNA/DNA和蛋白质/DNA比值增高等细胞肥大表型.与对照相比,MCGT1的胶原和FN合成与表达明显增加.结论GLUT1的过度表达使系膜细胞具有糖尿病肾病(DN)的细胞表型.GLUT1的功能状态直接影响系膜细胞的糖代谢及功能变化.