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目的克隆人IL-12(hIL-12)p40和p35亚单位cDNA,构建人单链IL-12(rhscIL-12)融合基因,并在哺乳动物细胞中进行表达。方法从经PDBu刺激的EBV转化的人B淋巴母细胞株NC37中提取mRNA,经RT-PCR分别获得hIL-12p40和p35亚单位编码序列的cDNA,运用重组PCR技术将两段基因通过一疏水性多肽接头(Gly4Ser)3 DNA序列进行体外基因重组,构建rhscIL-12融合基因,将其插入pcDNA3.1(+)真核表达载体,经脂质体转染COS7细胞进行表达,Western b1ot进行分析。结果所克隆的hIL-12p40、p35cDNA序列和构建的rhscIL-12融合基因DNA序列均经测序得以证实,融合基因可在COS7中表达其产物rhscIL-12融合蛋白,其分子量为70KD,可与鼠抗人IL-12p40/p70单克隆抗体特异性结合。结论本研究结果为进一步探讨rhscIL-12融合蛋白的生物学活性和特性奠定了基础,也为rhscIL-12融合基因在原核细胞中的表达提供了可能性。
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文献信息
篇名 重组人单链白细胞介素12融合基因(rhscIL一12)的构建和真核表达
来源期刊 西安交通大学学报(医学版) 学科
关键词 人白细胞介素12(hIL-12) 重组人单链白细胞介素12(rhscIL-12) 融合基因 真核表达
年,卷(期) 2000,(4) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 297-302
页数 6页 分类号 R392.11
字数 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1671-8259.2000.04.001
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 张梅 西安交通大学第一医院血液病研究室 134 882 14.0 24.0
2 王一理 西安交通大学免疫病理研究室 112 527 9.0 17.0
3 司履生 西安交通大学免疫病理研究室 63 275 8.0 12.0
4 耿宜苹 西安交通大学免疫病理研究室 1 1 1.0 1.0
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研究主题发展历程
节点文献
人白细胞介素12(hIL-12)
重组人单链白细胞介素12(rhscIL-12)
融合基因
真核表达
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
西安交通大学学报(医学版)
双月刊
1671-8259
61-1399/R
大16开
1937-01-01
chi
出版文献量(篇)
4401
总下载数(次)
0
总被引数(次)
26571
相关基金
陕西省自然科学基金
英文译名:Natural Science Basic Research Plan in Shaanxi Province of China
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