人血管内皮生长因子受体FLT-1胞外区1-3环cDNA的表达、纯化及鉴定

• 作者: 周小明 张智清 曾革非 王小宁 陈爱君 马骊
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血管内皮生长因子 受体 毕赤巴斯德酵母 表达
• 年，卷（期）: 2000,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 196-200
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4154字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2000.04.002

摘要

目的 研究人血管内皮生长因子受体FLT-1胞外区1-3环cDNA在酵母菌中的表达、纯化及生物学活性。方法 将编码316个氨基酸残基的人FLT-1胞外区1-3环cDNA插入到含AOX1启动子和d分泌信号肽序列的Pichia pastoris酵母载体中，构建了重组表达质粒pPICqk／FLT-1(1～3)，转化酵母宿主菌GS115，筛选His+Mut表型转化子，经摇瓶培养，1％甲醇诱导表达。结果 经SDS-PAGE显示，表达产物以可溶性分子形式存在于上清中，诱导4天的表达量达到培养上清总蛋白的60％，径Western blot检测抗原性及特异性良好，经CM-Sepharose FF阳离子交换层析和Sephacryls-100分子筛层析，纯度达90％以上；经生物活性检测具有结合hVEGFl65的能力和hVEGF165促进HUVEC的增殖功能。结论 人血管内皮生长因子受体FLT-1胞外区l～3环cDNA在酵母菌中表达成功。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马骊	中国人民解放军第一军医大学分子免疫学研究所	6	7	1.0	2.0
2	王小宁	中国人民解放军第一军医大学分子免疫学研究所	13	35	3.0	5.0
3	张智清		1	0	0.0	0.0
4	周小明		1	0	0.0	0.0
5	曾革非		1	0	0.0	0.0
6	陈爱君		1	0	0.0	0.0