p16逆转录病毒载体的构建及其高滴度克隆的杂交筛选

• 作者: 曹国栋 武莎莎 王申五 马丽萍
• 来源期刊: 中国生物化学与分子生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: p16逆转录病毒载体 vRNA斑点杂交 病毒滴度
• 年，卷（期）: 2000,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 82-85
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3167字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7626.2000.01.017

摘要

构建多肿瘤抑制基因p16(mts-1)的逆转录病毒载体,用一种简便的非放射性杂交方法,从多个包装细胞克隆中筛选出病毒滴度高的克隆,以提高病毒转导效率.以p16 cDNA全长为目的基因,构建逆转录病毒载体pLMSN,非脂质体转染试剂转染兼性包装细胞PT67,G418筛选抗性克隆,扩增单个克隆后提取包装细胞上清的病毒RNA(vRNA),以碱性磷酸酶直接标记的目的基因为探针作斑点杂文,化学发光自显影法定量测定,在短时间内从多个候选克隆中筛选出高产毒的克隆.为p16基因治疗的实验研究奠定了物质基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王申五	北京医科大学附属人民医院血研所	28	142	7.0	11.0
2	武莎莎	北京医科大学附属人民医院血研所	3	11	1.0	3.0
3	曹国栋	北京医科大学附属人民医院血研所	4	11	1.0	3.0
4	马丽萍	北京医科大学附属人民医院血研所	4	16	2.0	4.0