EGFP-N1/hNGF β逆转录病毒载体的构建及其表达

• 作者: SUN Kai 杨彩虹 田林强 郭风劲 陈安民 陈钢
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 神经生长因子 施万细胞 基因表达
• 年，卷（期）: 2011,（13）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1426-1429
• 页数: 4页
• 分类号: R34
• 字数: 1996字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建高表达含人神经生长因子β基因(hNGF-β)的逆转录病毒栽体,并检测其在施万细胞中的表达情况.方法 从含有hNGF-β的pAAV-SP质粒中克隆出hNGF-β,连接到pEGFP-N1载体中,形成重组逆转录病毒载体pEGFP-N1-NGFβ.用重组体转染施万细胞,经G418筛选出阳性克隆后,用ELISA法检测NGF的表达量.结果 hNGF-β的RT-PCR产物约750bp,双酶切鉴定重组载体为正确重组子.荧光显微镜下观察证实转染的施万细胞表达EGFP,ELISA检测证实转染的施万细胞分泌hNGF β升高.结论 应用体外连接法成功构建了hNGF-β逆转录病毒载体,而且施万细胞能够高效表达NGF β.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈安民	华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科	315	2057	20.0	29.0
2	郭风劲	华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科	215	1233	17.0	23.0
3	田林强	华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科	12	46	4.0	6.0
4	陈钢	江西省人民医院骨一科	30	77	5.0	7.0
5	杨彩虹	华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科	26	124	6.0	10.0
6	SUN Kai	江西省人民医院骨一科	1	0	0.0	0.0