双靶向诱导超抗原TSST-1基因重组逆转录病毒的包装及鉴定

• 作者: 任海亮 孙学军 成亮 王伟 王炜 禄韶英 郑见宝
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 逆转录病毒 超抗原 缺氧诱导 CEA阳性肿瘤 免疫基因治疗
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 540-544
• 分类号: R735.3
• 语种: 中文

摘要

目的 包装出携5拷贝缺氧反应元件(5HRE)增强子和癌胚抗原启动子(CEAp)联合调控的超抗原中毒性休克综合征毒素-1 (TSST-1)基因的逆转录病毒,并建立稳定表达TSST-1的人结肠癌Lovo细胞株.方法 应用已构建好的逆转录病毒载体pLEGFP N1 5HRE-CEAp TSST-1 linker-CD80TM,与辅助质粒pMB-MLV、pMB-G共转染入293T细胞,LaSRT法检测病毒滴度.包装出的逆转录病毒感染CEA阳性的人结肠癌细胞株Lovo和CEA阴性的人宫颈癌细胞株Hela.应用RT-PCR和免疫组化方法鉴定TSST-1的表达.结果 获得重组逆转录病毒滴度约为1×106 CFU/mL.RT-PCR及免疫组化证实经病毒感染的Lovo细胞在mRNA和蛋白水平均有TSST-1表达,缺氧环境中的mRNA表达量更高,且细胞传代20次后依然有TSST-lmRNA表达；经病毒感染的Hela细胞在常氧或缺氧状态下均无TSST-1mRNA及蛋白表达.结论 包装出较高滴度重组逆转录病毒,并能靶向性在CEA阳性肿瘤内稳定表达TSST-1,为后续检验TSST-1对肿瘤的杀伤效应奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王炜	西安交通大学医学院第一附属医院普外科	38	122	6.0	9.0
2	郑见宝	西安交通大学医学院第一附属医院普外科	48	185	7.0	10.0
3	孙学军	西安交通大学医学院第一附属医院普外科	116	617	12.0	19.0
4	王伟	西安交通大学医学院第一附属医院普外科	180	1518	19.0	32.0
5	禄韶英	西安交通大学医学院第一附属医院普外科	59	385	10.0	17.0
6	成亮	西安交通大学医学院第一附属医院普外科	4	11	2.0	3.0
7	任海亮	西安交通大学医学院第一附属医院普外科	5	26	4.0	5.0