人midkine基因重组逆转录病毒载体构建及鉴定

• 作者: 刘云鹏 张勇 徐莹莹
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 中期因子 逆转录病毒载体 转染
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 5-7
• 页数: 3页
• 分类号: Q253|Q279
• 字数: 2265字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0258-4646.2009.01.002

摘要

目的 构建人中期因子(MDK)基因重组逆转录病毒载体,转染人胃癌SGC7901细胞株,为探讨MDK的生物学功能奠定基础.方法 扩增人MDK编码序列基因片段,经限制性内切酶酶切后将目的 片段插入pLXSN逆转录病毒载体.经酶切及测序鉴定后与pVSVG共转染GP293包装细胞,收集病毒上清感染人胃癌SGC7901细胞,G418筛选获得阳性细胞株.,结果酶切及DNA测序证实MDK基因重组逆转录病毒载体构建正确.病毒上清感染SGC7901细胞,G418筛选出阳性克隆,经实时定量PCR及Western blot检测发现SGC7901细胞中MDK mRNA及蛋白表达水平明显上调.结论 成功构建了高表达MDK的SGC7901细胞株,为进一步探讨其生物学功能奠定实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘云鹏	中国医科大学附属第一医院肿瘤内科	299	1742	18.0	25.0
2	张勇	中国医科大学附属第一医院肿瘤内科	35	72	5.0	6.0
3	徐莹莹	中国医科大学附属第一医院肿瘤内科	12	54	5.0	7.0