人NT-3重组逆转录病毒载体及稳定包装细胞系的构建及鉴定

• 作者: 刘勇 吕海侠 李敏杰 杨广笑 王全颖
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: NT3 逆转录病毒载体 基因重组
• 年，卷（期）: 2002,（15）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 8-10
• 页数: 3页
• 分类号: R329.4
• 字数: 2506字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2002.15.003

摘要

目的:构建并鉴定携带人NT-3基因的逆转录病毒载体以及稳定的包装细胞系.方法:用DNA重组技术将人NT-3定向克隆入逆转录病毒载体pLXSN,并用限制性内切酶进行酶切鉴定;磷酸钙转染方法将重组的逆转录病毒转染入包装细胞系PA317,G418筛选建立稳定产病毒的细胞株.结果:构建的重组逆转录病毒载体可以被限制性内切酶EcoR I和BamHI切开,电泳分离显示两条阳性条带,分别出现于0.8kb和5.9kb处;重组载体转染包装细胞,经G418筛选,可形成抗性克隆,并测得病毒滴度为4×105cfu/ml,提示构建携带人NT-3基因的逆转录病毒载体以及稳定的包装细胞系成功.结论:构建携带人NT-3基因的逆转录病毒载体可行,并且可望成为一种很好的对神经系统疾病进行基因治疗的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘勇	西安交通大学医学院神经科学中心	158	1055	16.0	22.0
2	吕海侠	西安交通大学第二医院妇产科	53	330	10.0	15.0
3	李敏杰	西安交通大学医学院神经科学中心	12	152	7.0	12.0
4	王全颖		62	151	5.0	8.0
5	杨广笑		67	148	5.0	7.0