表达HIF1α与EGFP融合蛋白的重组逆转录病毒载体构建及鉴定

• 作者: 周跃 唐康来 杨柳 段小军 董世武
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 逆转录病毒 缺氧诱导因子-1 基因克隆
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 373-374,377
• 页数: 3页
• 分类号: Q573
• 字数: 2403字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2005.03.028

摘要

目的构建表达人缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与EGFP融合蛋白的重组逆转录病毒载体,并观察其对NIH3T3细胞感染效率.方法采用基因工程技术,将HIF-1α基因片段克隆至逆转录病毒载体pLEGFP-N1上,鉴定后用脂质体法转染PT67细胞包装、扩增,最后用重组逆转录病毒感染NIH3T3细胞.其中采用PCR方法对重组病毒进行鉴定,利用绿色荧光蛋白作为报告基因,对病毒滴度和感染效率进行监测.结果酶切、测序及PCR结果与HIF-1α基因重组逆转录病毒载体的预期结果一致,病毒滴度达1.2×106 pfu/ml,并对NIH3T3细胞有强感染能力.结论应用基因工程技术,成功构建了表达HIF-1α与EGFP融合蛋白的重组逆转录病毒载体,为应用于治疗性血管生成创造了条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周跃	第三军医大学新桥医院骨科	354	4854	36.0	56.0
2	杨柳	第三军医大学西南医院关节外科	296	2450	23.0	30.0
3	段小军	第三军医大学西南医院关节外科	109	852	17.0	21.0
4	唐康来	第三军医大学西南医院关节外科	109	900	15.0	23.0
5	董世武	第三军医大学基础部解剖学教研室	42	287	9.0	15.0