大鼠胃的主细胞分离纯化培养及功能测定

• 作者: Irvin M Modlin Laura H Tang 孙亮 缪锟
• 来源期刊: 南京医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 主细胞 胃蛋白酶原 分离 培养 动物,实验
• 年，卷（期）: 2000,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 339-341
• 页数: 3页
• 分类号: R573
• 字数: 2735字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4368.2000.05.004

摘要

目的通过建立分离纯化大鼠胃的主细胞培养系统,为进一步深入研究主细胞的生理调节和病理变化提供新的方法.方法采用链霉蛋白酶的消化、淘析法分离纯化大鼠胃的主细胞.主细胞的纯化率在光镜下根据细胞的大小、结构和颜色计算.用血红蛋白法测定胃蛋白酶.在主细胞的短期培养系统中,主细胞的最佳功能状态通过比较胆囊收缩素(CCK-8)、卡巴可林和异丙肾上腺素在不同培养时间和刺激状态下,主细胞分泌胃蛋白酶原的量而定.结果在泵速为37 ml/min收集分离的主细胞化率为83%～92%.细胞的存活率>95%.CCK-8 10-5 mol/L、卡巴可林10-4 mol/L和异丙肾上腺素10-5 mol/L刺激30 min后,主细胞分泌胃蛋白原的量在培养24 h明显高于培养6、12、36 h(P<0.05).在主细胞培养24 h后,CCK-8 10-5 mol/L,卡巴可林10-4 mol/L和异丙肾上腺素10-5 mol/L刺激主细胞45 min时胃蛋白酶原的分泌量明显高于刺激30、60、90 min(P<0.05).卡巴可林EC50为2×10-7 mol/L,在浓度为10-5 mol/L时最大分泌量是对照组的1.82倍(P<0.05).CCK-8的EC50为10-8 mol/L,在浓度为10-5 mol/L时最大分泌量是对照组的1.52倍(P<0.05).结论具有良好功能的分离纯化大鼠胃的主细胞培养系统已被建立.细胞培养24 h,刺激剂刺激45 min为最佳工作状态.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙亮	南京医科大学第一附属医院消化内科	6	20	3.0	4.0
2	缪锟	南京医科大学第一附属医院消化内科	6	44	3.0	6.0
3	Laura H Tang	美国耶鲁大学医学院外科系	1	5	1.0	1.0
4	Irvin M Modlin	美国耶鲁大学医学院外科系	1	5	1.0	1.0