基于核酸保护原理的DNA芯片检测技术

• 作者: 刘建华 曾而良 林志新
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: DNA芯片核酸保护
• 年，卷（期）: 2001,（1）
• 所属期刊栏目: 技术和方法
• 页码范围: 89-92
• 页数: 4页
• 分类号: R730.4|R446|Q522
• 语种: 中文

摘要

制备出3′-末端与载玻片交联、5′-末端用32p标记的检测DNA的芯片，方法以化学法合成了3′-末端为尿嘧啶核糖的寡聚脱氧核糖核苷酸片段。用32p标记寡核苷酸的5′-末端，经过高碘酸氧化后与玻璃基片表面的脂肪胺基缩合，并用硼氢化钠还原，制成寡核苷酸3′-末端与玻片共价交联、5′-末端为同位素标记的DNA芯片。将该芯片与液相中的核酸片段杂交，再用核酸酶S1酶切。结果当液相中的核酸与玻片上共价交联的寡核苷酸片段产生特异性杂交配对时，核酸酶S1不能酶切玻片上的寡核苷酸片段，且玻片上被保护的寡核苷酸量与液相中的与它配对的核酸量之间呈线性相关(r=0.9967,P＜0.001,n=7)。结论上述检测法可以定性和定量地检测液相中的核酸。由于该法制备的DNA芯片各个位点的DNA探针的含量为已知，待测的核酸样品无需进行同位素或荧光标记，操作简便，适用于对样品的DNA或RNA进行检测。