利用杆状病毒载体在家蚕幼虫中高效表达人胰岛素样生长因子-1的研究

• 作者: John S Sussenbach 张志芳 段宇 汪承亚 赵红 陈家伟
• 来源期刊: 中国生化药物杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人胰岛素样生长因子-1 基因表达 重组家蚕核型多角体病毒 生物学活性
• 年，卷（期）: 2001,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 274-277
• 页数: 4页
• 分类号: Q516|R392-33
• 字数: 2879字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-1678.2001.06.002

摘要

目的利用杆状病毒载体在家蚕幼虫中研制有生物学活性的可溶性分泌型重组人胰岛素样生长因子-1(rhIGF-1).方法将15 kD人IGF-1(hIGF-1)前体cDNA基因插入家蚕核型多角体病毒(BmNPV)转移载体pBakPAK8中,经与野生型病毒DNA共转染家蚕细胞后,通过体内同源重组的方式获得重组病毒BmNPV/IGF-1.以BmNPV/IGF-1感染5龄家蚕幼虫,分别在感染后24、48、72、96、108、120 h提取家蚕血淋巴液,以ELISA法测定不同时象家蚕血中IGF-1浓度,采用Western-blot分析鉴定IGF-1免疫学活性,MTT法观察其对NIH3T3细胞增殖的影响.结果 ELISA测定显示,BmNPV/IGF-1感染家蚕幼虫后,72 h起蚕血中IGF-1浓度随感染时间延长而逐渐增高(19.09～23.36 μg/ml),120 h IGF-1含量达到最高值(23.36 μg/ml),Western-blot分析发现表达产物在蚕体内被加工成7.5 kD成熟hIGF-1,并对NIH3T3细胞具有良好促增殖效应,其促细胞增殖能力明显优于来源于E.coli的IGF-1标准品.结论具有免疫学活性和生物学活性的rhIGF-1能够在家蚕幼虫虫体中获得高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	John S Sussenbach		2	24	2.0	2.0
2	段宇		1	21	1.0	1.0
3	汪承亚		1	21	1.0	1.0
4	赵红		1	21	1.0	1.0
5	陈家伟		1	21	1.0	1.0