利用杆状病毒载体在家蚕幼虫中高效表达人胰岛素样生长因子-2(hIGF-2)

• 作者: John S Sussenbach 张志芳 段宇 汪承亚 赵红 陈家伟
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 人胰岛素样生长因子-2 家蚕核型多角体病毒 基因表达 免疫学活性 生物学活性
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 156-160
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 2739字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5048.2002.02.021

摘要

目的:研制有生物活性的可溶性分泌型重组人胰岛素样生长因子-2(rhIGF-2).方法:将14 kD hIGF-2前体cDNA基因插入家蚕核型多角体病毒(BmNPV)转移载体pBakPAK8中,经与野生型病毒DNA共转染家蚕细胞后,通过体内同源重组的方式获得重组病毒BmNPV/IGF-2.以BmNPV/IGF-2感染5龄家蚕幼虫,分别在感染后24,48,72,96,108,120 h提取家蚕血淋巴液,以ELISA法测定不同时象家蚕血中IGF-2浓度,采用Western-blot分析鉴定IGF-2免疫学活性,MTT法观察其对NIH3T3细胞增殖的影响. 结果:ELISA测定显示,BmNPV/IGF-2感染家蚕幼虫96 h后IGF-2表达率最高,每毫升血淋巴中约含IGF-2 14 μg, Western-blot分析发现表达产物在蚕体内被加工成7.0 kD成熟hIGF-2,并对NIH3T3细胞具有良好促增殖效应,其促细胞生长能力明显优于来源于E.coli的IGF-2标准品.结论:本研究实现具有免疫学活性及生物学活性的rhIGF-2在家蚕杆状病毒表达系统的高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	段宇		91	824	15.0	25.0
2	汪承亚		49	415	11.0	18.0
3	赵红		11	117	5.0	10.0
4	陈家伟		99	1101	15.0	30.0
5	张志芳	中国农业科学研究院镇江蚕业研究所	76	600	14.0	20.0
6	John S Sussenbach	荷兰Utrecht大学病理生理实验室	2	24	2.0	2.0