利用杆状病毒载体高效表达人胰岛素样生长因子-1及其纯化的研究

• 作者: 段宇 汪承亚 赵红 陈家伟
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人胰岛素样生长因子-1 基因表达 重组家蚕核型多角体病毒 亲和层析 生物学活性
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 173-177
• 页数: 5页
• 分类号: R318
• 字数: 2845字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5048.2004.02.018

摘要

目的:利用杆状病毒载体在家蚕幼虫中研制有生物学活性的重组人胰岛素样生长因子-1(rhIGF-1).方法:将15kDhIGF-1前体cDNA基因插入家蚕核型多角体病毒(BmNPV)转移载体pBakPAK8中,构建重组病毒BmNPV/IGF-l.用BmNPV/IGF-1感染家蚕幼虫,提取家蚕血淋巴液,采用亲和层析法纯化rhlGF-1,ELISA法测定rhIGF-1含量,用SDS-PAGE和Western-blot分析鉴定rhIGF-1纯度及免疫学活性,MTF法观察其对MCF-7细胞增殖的影响.结果:ELISA测定显示,BmNPV/IGF-1感染家蚕幼虫120h rhIGF-1含量达最高值(23.36μg/ml).rhIGF-1纯度为40%,Westem-blot分析发现主要纯化产物为7.5 kD成熟hIGF-1.细胞活性刺激实验显示,纯化后rhIGF-11对MCF-7细胞促增殖能力明显优于来源于大肠杆菌的rhIGF-1产品.结论:实现了具有免疫学活性及生物学活性rhlGF-1在杆状病毒表达系统的高效表达,并使rhIGF-1得到初步纯化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	段宇		91	824	15.0	25.0
2	汪承亚		49	415	11.0	18.0
3	赵红		11	117	5.0	10.0
4	陈家伟		99	1101	15.0	30.0