6A8α-甘露糖苷酶酶解p-nitrophenyl-α-D-mannopyranoside

• 作者: 刘音 史耕先 朱立平 李琳 王壮志 赵方萄
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 6A8 α-甘露糖苷酶 COS-7细胞 瞬时表达
• 年，卷（期）: 2001,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 423-427
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 语种: 中文

摘要

目的明确6A8 cDNA编码蛋白质的α-甘露糖苷酶性质.方法利用基因重组技术将克隆到的3个DNA片段拼接成完整6A8 cDNA,将其插入到真核表达载体pCDI,转染COS-7细胞,用酶活性检测与Western blot对瞬时表达的蛋白质的性质进行鉴定.结果拼接后的cDNA片段经测序完全符合6A8 cDNA碱基顺序.转染重组表达载体pCDI-6A8的COS-7细胞的匀浆对p-nitrophenyl-α-D-mannopyranoside的酶解作用为转染空载体pCDI的细胞及野生型细胞的3～4倍,且这种酶解作用不能被swainsonine所抑制.Western blot检测显示在相对分子质量(Mr)120 000处有一明显蛋白带,此带的显影于转染pCDI-6A8 cDNA的细胞明显深于转染空载pCDI及野生型细胞.结论6A8 cDNA编码的蛋白质确为一种α-甘露糖苷酶,属于Ⅱ类α-甘露糖苷酶.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱立平		14	54	5.0	7.0