不同方法抽提血清HBV DNA得率的比较

• 作者: 吴文雅 孔宪涛 徐文胜 潘怡 缪晓辉
• 来源期刊: 肝脏
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎病毒,乙型 基因检测 聚合酶链反应 抽提方法
• 年，卷（期）: 2001,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 219-221
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 3282字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-1704.2001.04.002

摘要

目的比较不同的HBV DNA抽提方法对PCR产物量的影响.方法将HBV DNA阳性血清及投入了HBV DNA质粒的HBV DNA阴性血清,分别采用7种不同方法抽提核酸.抽提物作PCR后,产物行琼脂糖凝胶电泳,并对阳性扩增条带进行密度定量.结果血清直接煮沸法、经典的蛋白酶裂解加酚/氯仿抽提法、蛋白酶裂解加酚/氯仿抽提法省缺乙醇沉淀和柱抽提法的HBV DNA抽提得率分别为75 2%、13.8%、21.9%和31.0%;用碱变性裂解和蛋白酶裂解后煮沸所得上清液,以及血清直接作为模板,行PCR后不能得到阳性扩增条带.结论核酸抽提方法选择不当能直接影响基因检测的灵敏度,导致基因定量准确性下降.血清直接煮沸法抽提HBV DNA得率高、操作简便、省时和经济,值得推荐.