茶树基因组DNA提纯与RAPD反应系统建立

• 作者: 余桂容 吴洁 徐利远 蔡平钟 谭和平
• 来源期刊: 西南农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 茶树 基因组DNA 提纯 RAPD 反应系统
• 年，卷（期）: 2001,（1）
• 页码范围: 99-101
• 页数: 3页
• 分类号: Q781
• 字数: 2515字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-4829.2001.01.025

摘要

DNA的提取质量是决定RAPD分析成功与否的关键。茶树幼嫩新梢中含有大量的茶多酚等次生物质，采用磨样时添加抗酚类氧化褐变的物质，在细胞核裂解之前去除细胞质中的茶多酚和蛋白质，而后再用改进的DNA微量快速提取法——SDS法分别从不同茶树品种新梢中提取和纯化基因组DNA，所得到的DNA样品适宜于RAPD反应。通过对茶树RAPD分析中影响扩增结果的因素的研究，建立了茶树RAPD的最适反应系统，即在25ul反应体系中，含20-50ng模板DNA，1.5mmol/lMgCl2，各0.1mmol/lDNTPs，0.2umol/L引物和1UTaqDNA聚合酶；扩增程序为：95℃预变性300s，94℃变性60s，35℃退火60s，72℃延伸120s，共进行40个循环，最后72℃延伸600s，这样可以取得较好的扩增效果。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余桂容		32	265	9.0	15.0
2	徐利远		35	308	12.0	16.0
3	蔡平钟		33	250	7.0	14.0
4	谭和平		7	27	3.0	5.0
5	吴洁		28	366	10.0	18.0