棉铃虫半胱氨酸蛋白酶底物特异性研究

• 作者: 张志宏 徐夏莲 李斐雪 李照民 王金星 赵小凡
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 棉铃虫 半胱氨酸蛋白酶 底物特异性 Km值
• 年，卷（期）: 2001,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 152-155
• 页数: 4页
• 分类号: S433
• 字数: 3632字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2001.02.013

摘要

为了研究棉铃虫(Helicoverpa armigera)半胱氨酸蛋白酶的底物专一性,进一步阐明该蛋白酶的性质和应用前景,从棉铃虫卵巢中纯化了该蛋白酶,用电泳方法检测了该蛋白酶对牛血红蛋白(Hb)、牛血清蛋白(BSA)、卵黄磷蛋白(Vn)、明胶(gelatin)等4种动物蛋白,及大豆、玉米、马铃薯、豇豆、向阳花种子及棉籽蛋白等6种植物蛋白的水解作用.结果显示该酶对4种动物蛋白及6种植物蛋白都有明显水解活性.用吸光度测定法测定了棉铃虫半胱氨酸蛋白酶对牛血红蛋白、牛血清蛋白、卵黄磷蛋白、明胶等4种底物的米氏常数(Km)值.结果显示棉铃虫半胱氨酸蛋白酶对牛血红蛋白和卵黄磷蛋白的水解产物的吸光度值较高,而对牛血清蛋白和明胶的水解产物的吸光度值较低.测得该蛋白酶对牛血红蛋白、牛血清蛋白、卵黄磷蛋白、明胶的Km值分别为10、0.91、0.08 μmol/L和250mg/L,其中对卵黄磷蛋白的Km值最小,说明棉铃虫半胱氨酸蛋白酶与卵黄磷蛋白的亲和力最大,即卵黄磷蛋白是棉铃虫半胱氨酸蛋白酶的最适底物.同时用电泳方法检测了该蛋白酶对粗提的棉铃虫卵黄磷蛋白的水解作用,结果显示该酶对其有明显水解活性,由此推测该酶可能参与棉铃虫胚胎发育中卵黄磷蛋白的水解.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李照民	山东大学生命科学院	3	29	3.0	3.0
2	赵小凡	山东大学生命科学院	50	618	13.0	24.0
3	王金星	山东大学生命科学院	53	698	15.0	25.0
4	李斐雪	山东大学生命科学院	2	19	2.0	2.0
5	张志宏	山东大学生命科学院	5	37	4.0	5.0
6	徐夏莲	山东大学生命科学院	2	19	2.0	2.0