链替换技术提高抗角蛋白人Fab抗体的亲和力

• 作者: 乔媛媛 刘玉峰 化冰 王刚 王琰
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 亲和力成熟 噬菌体抗体库 单克隆抗体 角蛋白
• 年，卷（期）: 2001,（2）
• 所属期刊栏目: 基因工程抗体
• 页码范围: 160-163
• 页数: 4页
• 分类号: R394
• 字数: 4863字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2001.02.012

摘要

目的通过链替换技术对一株人源性抗角蛋白Fab单抗进行体外亲和力成熟。方法分离、扩增多样性人免疫球蛋白轻链基因和IgG/IgM重链Fd段基因，分别构建轻链库和重链库。先以原始克隆的重链与轻链库随机搭配进行轻链替换，对形成的换链库采用解离速率筛选法（off-rate selection）选取亲和力提高的克隆；然后再将获得的轻链基因与重链库基因重组进行重链替换，筛选亲和力进一步提高的克隆并进行亲和力测定、可变区基因序列分析等一系列鉴定。结果替换轻链后所获抗体的亲和力提高到原来的10倍；替换重链后亲和力进一步提高达到7.9×1010/mol/L，是原始克隆的近23倍。结论链替换技术是提高抗体库中所获Fab抗体亲和力的有效手段。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘玉峰	第四军医大学西京医院皮肤科	278	1616	19.0	26.0
2	王刚	第四军医大学西京医院皮肤科	228	823	15.0	19.0
6	王琰		15	176	9.0	13.0
7	乔媛媛		6	69	4.0	6.0
8	化冰		8	109	6.0	8.0