联合应用错配PCR和交替延伸PCR法提高抗TNFα抗体亲和力

• 作者: 乔媛媛 曲佳 汪保安 王欲晓 王琰 陈晓穗
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 错配PCR 交替延伸PCR 抗体亲和力 斑点ELISA
• 年，卷（期）: 2004,（12）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 846-849
• 页数: 4页
• 分类号: R392-33
• 字数: 4312字
• 语种: 中文

摘要

目的:通过突变方法提高抗TNFα单链抗体pscTNF的亲和力.方法:以pscTNF质粒为模板,应用错配PCR构建突变抗体库,筛选亲和力得到改善的变种,再以所获变种为模板,用交替延伸PCR技术,再次构建突变库,筛选活性得到改良的克隆.以斑点ELISA方法及硫氰酸盐洗脱ELISA法评估其亲和力的改善.结果:从错配PCR抗体库中筛选得到7个活性有所增强的变种,再通过交替延伸PCR使这7个变种的突变位点交换重组,获得了亲和力进一步提高的克隆.结论:联合应用错配PCR和交替延伸PCR法可提高单链抗体亲和力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	乔媛媛	海军总医院中心实验科	45	153	7.0	10.0
2	王琰	海军总医院中心实验科	59	302	9.0	14.0
3	王欲晓	海军总医院中心实验科	29	62	5.0	5.0
4	曲佳	海军总医院中心实验科	23	67	5.0	6.0
5	汪保安	海军总医院中心实验科	4	15	3.0	3.0
6	陈晓穗	海军总医院中心实验科	11	67	4.0	8.0