鸡贫血病毒全基因组点突变体的体外构建及其在宿主细胞MSB1的转染研究

• 作者: 刘岳龙 孙春根 崔治中 秦爱建 金文杰
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡贫血病毒 全基因组 点突变 克隆 转染
• 年，卷（期）: 2001,（2）
• 页码范围: 136-139
• 页数: 4页
• 分类号: S858.31
• 字数: 2484字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2001.02.009

摘要

在已构建鸡贫血病毒（CAV）全基因组体外克隆（pCAV2.4）的基础上，设计一对特定引物，用PCR定向点突变方法扩增出含有完整的EcoRI位点的CAV全基因组（2.3kb），并克隆入pUC18载体中，获得阳性克隆，命名为pCAVE+。经酶切鉴定和序列分析EcoRI位点两侧序列，原先不完整的EcoRI位点（-GACTTC-）已被定向点突变为完整的EcoRI位点（-GAATTC-）。对重组质粒pCAVE+以EcoRI酶切回收CAV全基因组DNA，在体外连接并经纯化后，经Effectene转染易感宿主细胞MSB1。将转染细胞培养上清连续传代8次以后，出现病毒复制（MSB1细胞培养基颜色不再变黄）。取此时细胞培养液感染无CAV的1日龄SPF小鸡，14天出现典型的鸡贫血症状和胸腺萎缩、骨髓脂肪变性等病变。获得了能在体外自主复制并组装成完整CAV病毒子的感染性核酸。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔治中	扬州大学畜牧医学院	31	832	12.0	28.0
2	秦爱建	扬州大学畜牧医学院	153	1966	21.0	38.0
3	刘岳龙	扬州大学畜牧医学院	57	1051	19.0	30.0
4	金文杰	扬州大学畜牧医学院	85	1181	18.0	31.0
5	孙春根	扬州大学畜牧医学院	1	2	1.0	1.0