抗人γ-精浆蛋白VH单域抗体/人p53四价功能域融合基因的构建及空间构象分析

• 作者: 武国军 王智 王栋 王禾 袁建林 郝晓柯
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 人γ-精浆蛋白 单域抗体 p53四价功能域 融合基因
• 年，卷（期）: 2001,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 505-509
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8259.2001.06.004

摘要

目的构建抗人γ-精浆蛋白(γ-Sm)重链可变区(VH)单域抗体/人p53四价功能域融合基因,并进行空间构象分析.方法选用人IgG3上游铰链区作为抗体和人p53四价功能域之间连接的linker.利用回归PCR法扩增人IgG3上游铰链区与人p53四价功能域融合基因,并在融合基因5'端和3'端引入SalⅠ与HindⅢ酶切位点,将融合基因克隆入pUC19载体中构建pUC19/IgG3/p53克隆载体.将抗人γ-Sm VH单域抗体克隆入pUC19/IgG3/p53载体中,构建抗人γ-Sm VH单域抗体/人p53四价功能域融合基因.经酶切鉴定及序列测定证实后,利用计算机软件进行空间构象分析.结果获得了抗人γ-Sm VH单域抗体/人 p53四价功能域融合基因,基因全长528bp,可编码176个氨基酸,与已发表的抗人γ-Sm VH单域抗体、人IgG3上游铰链区和人p53四价功能域基因cDNA序列一致.计算机软件分析结果显示,融合基因表达产物可自动装配成四聚体抗体,并具有四条长的、柔性好的多肽,可确保每个抗体空间构象的独立性.结论构建成功四价抗人γ-Sm VH单域抗体,为进一步临床应用奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王禾	第四军医大学西京医院泌尿外科	231	1042	15.0	20.0
2	武国军	第四军医大学西京医院泌尿外科	100	426	11.0	14.0
3	郝晓柯	第四军医大学唐都医院实验室	322	1751	18.0	23.0
4	王栋	第四军医大学西京医院泌尿外科	33	135	7.0	10.0
5	王智	第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室	21	51	5.0	6.0
6	袁建林	第四军医大学西京医院泌尿外科	169	598	11.0	15.0