抗PSA单链抗体/p53四聚功能域融合基因的构建及表达

• 作者: 于磊 武国军 王栋 王禾 袁建林 郝晓柯
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 前列腺特异抗原 p53四聚功能域 融合基因
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 54-57
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3143字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2003.01.014

摘要

目的: 构建抗人前列腺特异抗原(PSA)单链抗体(scFv)/人p53四聚功能域融合基因,并进行真核表达和活性测定. 方法: 利用递归PCR法扩增人IgG3上游铰链区与人p53四聚功能域融合基因,克隆入pUC19载体中构建pUC19/IgG3/p53克隆载体.将抗PSA scFv克隆入pUC19/IgG3/p53载体中,构建抗PSA scFv/人p53四聚功能域融合基因.经酶切鉴定及序列测定证实后,将融合基因克隆入真核表达载体pSecTag2-B中,转染HeLa细胞进行表达,表达产物纯化后利用流式细胞仪进行活性测定. 结果: 获得了抗PSA scFv/人p53四聚功能域融合基因,基因全长891 bp,可编码297个氨基酸,与已发表的抗PSA scFv、人IgG3上游铰链区和人p53四聚功能域基因cDNA序列一致.表达产物经SDS-PAGE和Western印迹实验证实为约35 kD的特异蛋白条带,纯化后经流式细胞仪检测可以特异性地结合PC-3细胞,亲和力高于scFv. 结论: 获得了可与PC-3细胞特异结合的抗PSA scFv四聚体,为进一步临床应用奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王禾	第四军医大学西京医院泌尿外科	231	1042	15.0	20.0
2	武国军	第四军医大学西京医院泌尿外科	100	426	11.0	14.0
3	郝晓柯	第四军医大学西京医院检验科	322	1751	18.0	23.0
4	王栋	第四军医大学西京医院泌尿外科	33	135	7.0	10.0
5	于磊	第四军医大学西京医院泌尿外科	47	147	6.0	9.0
6	袁建林	第四军医大学西京医院泌尿外科	169	598	11.0	15.0