乙醇诱导肝癌细胞凋亡及其单克隆抗体的制备

• 作者: 司晓辉 杨连君 王文亮
• 来源期刊: 临床与实验病理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 凋亡 抗体,单克隆 癌,肝细胞 乙醇
• 年，卷（期）: 2001,（3）
• 页码范围: 249-252
• 页数: 4页
• 分类号: R735.7
• 字数: 2629字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-7399.2001.03.019

摘要

目的：探讨原发性肝细胞癌（简称肝癌）细胞凋亡过程中相关分子的表达情况，制备抗肝癌凋亡细胞相关抗原的单克隆抗体（mAb）。方法：用含6%乙醇的培养液培养肝癌细胞系HCC-9204细胞6h诱导其凋亡，透射电镜观察细胞形态变化，TUNEL法检测细胞DNA片段化发生情况，流式细胞仪分析细胞DNA含量变化。环磷酰胺消减免疫法免疫小鼠。杂交瘤法制备抗凋亡细胞的mAb。ELISA法筛选在凋亡细胞高表达，而在非凋亡细胞低表达的mAb。有限稀释法连续克隆化。用免疫细胞化学ABC法进一步筛选和分析，并进行杂交瘤细胞染色体和免疫球蛋白（Ig）类型分析。结果：6％乙醇作用HCC-9204细胞6h后，可见明显的凋亡形态学变化，大部分细胞为TUNEL染色阳性，并且流式细胞仪检测可见亚二倍体凋亡峰。经连续克隆化筛选出1株在乙醇诱导凋亡的HCC-9204细胞的胞核高表达，而在未经诱导凋亡的HCC-9204细胞低表达的mAb。染色体分析结果符合mAb杂交瘤细胞特征，其Ig类型为IgG1。结论：低浓度乙醇诱导凋亡的HCC-9204肝癌细胞中有某些相关分子的表达升高。初步获得了1株可能是抗乙醇诱导的肝癌细胞凋亡相关抗原的mAb。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	司晓辉	上海第二医科大学第九人民医院口腔医学研究所	27	254	10.0	15.0
2	王文亮	第四军医大学病理学教研室	128	902	14.0	21.0
3	杨连君	第四军医大学病理学教研室	30	139	8.0	11.0