从MT2和HeLa细胞及人和黑猩猩PBMC的DNA扩增出与GBV-C高同源性的核苷酸

• 作者: 严杰
• 来源期刊: 中国药理学报(英文版)
• 学科: 医学
• 关键词: GB肝炎剂 猴疾病 核酸序列同源性 荧 光显微镜检查 DNA 人类 单核细胞 聚合酶链反 应
• 年，卷（期）: 2001,（4）
• 所属期刊栏目: 研究原著
• 页码范围: 320-326
• 页数: 7页
• 分类号: R96
• 语种: 英文

摘要

目的：检测人源性细胞株DNA及人和黑猩猩外周血 单核细胞(PBMC)DNA中是否存在与GBV-C基因 组同源的核苷酸序列.方法：用PCR模板制备试剂 盒提取MT2和HeLa细胞DNA及6例人和1例黑猩 猩PBMC DNA，DNA经DNase的RNase消化后再用 苯酚-氯仿提取.直接以上述DNA为模板，用GBV- C 5＇-NCR和NS3区引物进行套式PCR(dPCR)扩增. dPCR产物进行核苷酸序列分析，并用引物介导原位 扩增(PRINS)DNA序列特异荧光标记技术确定扩增 片段在染色体上的位置.结果：从MT2和HeLa细 胞DNA及4例人PBMC DNA标本中获得GBV-C 5＇- NCR引物扩增片段.从MT2和HeLa细胞DNA及5 例人和1例黑猩猩PBMC DNA标本中获得NS3区引 物扩增片段.这些扩增产物的核苷酸序列与GBV-C 基因组同源性为73.80％-79.15％.PRINS检测 结果显示dPCR阳性的PBMC及其染色体上有荧光 着色.结论：MT2和HeLa细胞DNA及人和黑猩猩 PBMC DNA中存在与GBV-C 5＇-PCR和/或NS3区同 源性较高的核苷酸序列，这些序列位于dPCR阳性 的PBMC染色体上.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严杰	浙江大学医学院病原生物学研究所	265	1149	14.0	20.0