受强力霉素调节的自杀基因表达载体系统的构建和在乳腺癌细胞株(MCF-7)的表达

• 作者: 易伟峰 曾赵军 罗赛群 胡维新 陈迁
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 人乳腺癌细胞株 基因治疗 自杀基因 旁观者效应 基因表达调控 强力霉素
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 137-141
• 页数: 5页
• 分类号: Q784|Q786
• 字数: 3215字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7847.2002.02.007

摘要

自杀基因治疗是恶性肿瘤基因治疗中最常用的途径之一.以逆转录病毒载体--pRevTRE为基础进行载体构建,首先使用PCR技术对单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSVtk)进行扩增,将HSVtk基因插入到pRevTRE,形成重组载体pRevTRE/HSVtk,用磷酸钙共沉淀法,经过两轮转染,分别将pRevTRE/HSVtk和pRevTet-On质粒导入乳腺癌细胞株(MCF-7).经过潮霉素B(Hygromycin B)和G418筛选,建立了一株稳定的受四环素衍生物--强力霉素(Doxycycline,Dox)调控、表达HSVtk基因产物的人乳腺癌细胞株MCF/TRE/tk/Tet-On.HSVtk基因表达产物可以将无毒性的药物前体Ganciclovir (GCV)转变成一种有毒的代谢产物,从而杀死乳腺癌细胞株(MCF-7),达到基因治疗的目的.