模拟卵巢癌抗原的人源化抗独特型抗体的构建与表达

• 作者: 冯捷 刘蓓 崔恒 昌晓红 曹善津 李小平 钱和年
• 来源期刊: 中国妇产科临床杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 抗独特型抗体 人源化 人IgG1 卵巢肿瘤 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2002,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 44-47
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 2745字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-1861.2002.01.014

摘要

目的对模拟人卵巢癌抗原的鼠源性抗独特型单链抗体6B11scFv进行人源化改造和表达.方法采用重叠PCR和基因工程技术,将6B11scFv基因与人IgG1铰链区和CH3区的基因进行融合,构建人源化抗独特型抗体6B11VHVLhC基因.用IPTG诱导大肠杆菌进行表达,并采用酶切法、DNA测序、SDS-PAGE电泳、ELISA和免疫印迹技术等进行鉴定.结果酶切和DNA测序表明插入片段正确;SDS-PAGE凝胶电泳显示融合蛋白分子量50 000 Da处有一诱导蛋白带;而不连续非变性凝胶电泳表达产物分子量为100000 Da;ELISA和免疫印迹结果显示,表达出的6B11VHVLhC人源化抗体仍具有6B11scFv和人IgG1CH3的活性.结论已成功构建并表达出双价的可模拟卵巢癌抗原的人源化抗独特型抗体.