破骨细胞转基因永生化问题的初步探讨

• 作者: 于世凤 李斌斌
• 来源期刊: 中国骨质疏松杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 破骨细胞 转基因 永生化
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 290-292
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 3233字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-7108.2002.04.004

摘要

目的通过转基因技术建立破骨细胞永生化细胞系.方法经1,25(OH)2D3诱导,获得小鼠骨髓来源的破骨前体细胞.脂质体法(Fugene 6)将猿猴病毒40(SV40)和绿色荧光蛋白(GFP)质粒分别转染入破骨前体细胞,G418筛选抗性克隆;同时将GFP转染入逆转录病毒包装细胞(PT67)中,作为方法对照.继而,用含有GFP的逆转录病毒感染破骨前体细胞,G418筛选抗性克隆.结果获得小鼠骨髓来源的破骨前体细胞.Fugene 6转染SV40和GFP到破骨前体细胞后,G418筛选未获得阳性克隆,但GFP转染PT67细胞后获得阳性克隆和含有GFP的逆转录病毒.将含有GFP的逆转录病毒感染破骨前体细胞,G418筛选未获得阳性克隆.结论通过破骨细胞转基因永生化,建立破骨或破骨前体细胞系的方法是一个非常有意义的研究课题,但是难度较大.可以初步认为:脂质体和逆转录病毒载体的方法不是破骨细胞转基因的最佳方法.