日本血吸虫中国大陆株抱雌沟蛋白编码基因的克隆和表达

• 作者: 冯新港 吴祥甫 周元聪 张亮 林矫矫 蔡幼民 金亚美
• 来源期刊: 生物化学与生物物理学报
• 学科: 医学
• 关键词: 日本血吸虫 抱雌沟蛋白 基因克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2002,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 311-317
• 页数: 7页
• 分类号: R38
• 语种: 英文

摘要

根据曼氏血吸虫抱雌沟蛋白基因SmGcp序列和日本血吸虫编码抱雌沟蛋白保守区的基因片段SjGcp1分别设计三对引物, 以日本血吸虫中国大陆株成虫mRNA为模板, 用RT-PCR 法扩增出大小为1949 bp的基因片段. 经序列分析推断该基因片段含编码日本血吸虫抱雌沟蛋白基因的完整阅读框, 与SmGcp碱基一致性为85%, 其理论推测氨基酸组成与曼氏血吸虫抱雌沟蛋白的一致性为83.7%. 将上述扩增的基因片段克隆到表达载体pET28c(+)中, 在大肠杆菌BL21中获得表达, 融合表达产物分子量约为80 kD. 利用日本血吸虫成虫抗原免疫血清对该表达产物进行Western 印迹检测, 在预测位置出现了明显的识别条带, 说明该编码日本血吸虫中国大陆株抱雌沟蛋白基因的表达产物具有抗原性.