海南根瘤菌I66 nodD基因DNA片段的克隆

• 作者: 李小红 杨苏声 温尚昆
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 海南根瘤菌 nodD基因 克隆
• 年，卷（期）: 2002,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 50-52
• 页数: 3页
• 分类号: S432
• 字数: 2041字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2002.01.012

摘要

从海南根瘤菌(Rhizobium hainanense)I66提取总DNA,用XbaI完全酶切,然后用苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobiummeliloti)042B的nodDDNA片段作探针进行Southem杂交,发现2条含有nodD基因DNA片段的阳性条带,分别为4.0和6.0 kb.电泳回收含有4.0～6.0kb的DNA片段,用pUCl8作载体连接,并转化E.coliDH5α,构建含有nodD的部分基因文库.提取该文库的质粒与nodD探针做点杂交,筛选到nodD的阳性克隆,称为pUOD75.再将pUOD75的nodd片段克隆到pBBR-MCS-5,构建成pBOD75.用两亲本杂交,把pBOD75转入豌豆根瘤菌蚕豆生物型(Rhizobium eguminosarum bv.viciae)LPR5045,用类黄酮化合物毛地黄黄酮和染料木黄酮分别诱导其转化子.结果发现被毛地黄黄酮诱导的转化子显现蓝色.海南根瘤菌I66nodD基因在毛地黄黄酮诱导下得到表达,说明其表达产物可能具有结瘤调节功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李小红	中国农业大学生物学院微生物学系	10	155	5.0	10.0
2	温尚昆	中国农业大学生物学院微生物学系	2	7	1.0	2.0
3	杨苏声	中国农业大学生物学院微生物学系	23	267	8.0	16.0