含野生型p53cDNA重组逆转录病毒的制备

• 作者: 张一鸣 李艳利 王若宁 陈丙莺
• 来源期刊: 南京医科大学学报(自然科学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 野生型p53cDNA 逆转录病毒表达载体
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 299-300
• 页数: 2页
• 分类号: R730.5|Q782
• 字数: 1666字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4368.2002.04.011

摘要

目的:制备含野生型p53cDNA重组体的复制缺陷型逆转录病毒.方法:设计引物PCR扩增野生型p53cDNA,用T-A克隆的方法克隆入质粒载体pGEM-T,转化JM109,提取pGEM-T/p53重组体,双酶切得到野生型p53cDNA,然后再克隆入逆转录病毒表达载体pLXSN,转化感受态大肠杆菌JM109,筛选pL(p53cDNA)SN重组体,脂质体法转染包装细胞AM12,G-418(geneticin)筛选,收集病毒液.结果:通过PCR和重组质粒酶切筛选出重组阳性克隆,收集含pL(p53cDNA)SN重组体的逆转录病毒.结论:含pL(p53cDNA)SN重组体的复制缺陷逆转录病毒可用于转染真核细胞等进一步研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张一鸣	南京医科大学生物化学教研室	44	170	7.0	10.0
2	王若宁	南京医科大学生物化学教研室	14	38	4.0	5.0
3	陈丙莺	南京医科大学生物化学教研室	9	22	3.0	4.0
4	李艳利	南京医科大学生物化学教研室	14	89	6.0	8.0